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DNA点突变试剂盒 (ToloAccurate)

ToloAccurate点突变试剂盒是一种高效的位点特异性突变试剂盒,可以在环形双链DNA质粒上进行快速突变(碱基替换、碱基删除、碱基插入)。试剂盒中含有Dpx高保真DNA聚合酶,T4 PNK、T4 DNA Ligase和DpnI组成的一步法连接混合液,高效感受态细胞。以质粒为模板,利用设计的突变引物(见下图)进行PCR扩增之后,经过DNA凝胶电泳并进行回收、纯化后,采用连接混合液进行一步连接。最后将连接液直接转化高效的感受态细胞即可。该方法对质粒模板的要求低、突变的成功率高、能够轻松完成大质粒(10kb以上)的一步法突变。

实验设计


注意事项:

*,也可以把退换的碱基设计在引物的5’端,这样也会很方便。
**,如果插入的序列(或者替换)很长的话,可以把要插入(替换)的序列平均分成两段,然后分别挂着两条引物的5’端。通常情况下,一条长度为20碱基的完全配对的引物可以很高效地挂上50碱基的插入(替换)序列。因此,对于小于100碱基的插入(替换),可以通过该方法一步法轻松获得。而对于长于100碱基的实验要求,则可以通过两轮或者多轮PCR来依次进行(即,每轮100碱基)。

产品组成

Dpx DNA polymerase; 10X Dpx polymerase Buffer; dNTPs; Enyzme mix (PNK/Ligase/DpnI); Competent cell (FF_Grow)

储存条件

酶在-20 °C保存;感受态细胞在-80 °C保存

订购信息

产品货号产品信息产品规格产品价格 (RMB)
24201ToloAccurate Mutagenesis kit20 次500

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